尊龙凯时的2DLuminescent Cell Viability Assay利用ATP依赖的荧光素酶催化的荧光素发光反应，通过化学发光信号定量检测细胞内ATP含量，从而评估细胞活力或活细胞数。该方法显示出优良的检测线性范围、卓越的灵敏度以及可靠的稳定性。使用96孔板时，检测范围可涵盖100至100,000个细胞，且具体细胞的检测数量上限可能有所不同。此外，该检测试剂盒操作简单，提供即用型试剂，读数稳定且检测速度快，约10分钟内即可完成，无需对细胞进行洗涤或更换培养液。相较于其他常见细胞活力测定技术，如Calcein-AT和CCK-8，尊龙凯时的2DLuminescent Cell Viability Assay显得更为简便高效。

2DLuminescent Cell Viability Assay（货号：abs50065）具有高灵敏度和广泛的线性范围，适合小样本及高通量筛选。产品优势包括：

1. 方便快速：试剂盒内检测试剂为即用型，稳定且迅速，约10分钟内完成检测；
2. 灵敏度高：能够检测最低10nmol的ATP；
3. 线性范围广：在96孔板中，细胞数目从100至100,000个之间呈良好线性关系；
4. 高通量：支持小样本检测及高通量筛选。

使用方法：

一、试剂准备
试剂融化：将试剂于实验前一天取出，在4℃下过夜融化，亦可于实验当天在室温融化，或在22℃水浴融化，但水温不可超过25℃。
平衡至室温：若试剂未在室温下融化，则使用前可置于22℃水浴平衡，确保达到室温。一般5mL包装需约10分钟，50mL包装需约20分钟。
混匀：使用前轻柔颠倒5次以确保溶液均匀混合。
添加TritonX-100（货号：abs9149）：取出所需体积的试剂，加入适量TritonX-100，使其终浓度为0.2%。

二、检测步骤
1. 细胞培养：选用适合化学发光检测的96孔板（货号：abs7149），每孔接种100μL细胞，设置不含细胞的培养液作为阴性对照，并可设置浓度梯度以优化实验效果。将细胞在37℃、5%CO2的条件下培养，按需添加药物。
2. ATP标准曲线制作（可选）：使用PBS稀释ATP标准溶液至适当浓度梯度，96孔板每孔加入100μL标准品。
3. 细胞活力检测：
（1）融化并平衡室温的检测试剂，加入适量的TritonX-100；
（2）将细胞培养板室温平衡10分钟；
（3）每孔加入100μL检测试剂（尽量避免边缘孔）；
（4）室温振荡2分钟，以促进细胞裂解；
（5）在室温放置10分钟，使发光信号稳定；
（6）使用多功能酶标仪进行化学发光检测，设置合适参数；
（7）根据化学发光数值计算细胞相对活力，或通过ATP标准曲线确定ATP含量。

注意事项：
1. 温度：荧光素酶对温度敏感，建议分装后置于-20℃避光保存，使用前需平衡至室温；
2. 化学因素：荧光素酶反应速率受化学环境影响，需注意培养基和药物对发光强度的影响；
3. 光敏感：试剂需避光保存，避免光照导致发光衰减；
4. ATP污染：操作时佩戴口罩和手套，避免接触污染表面。

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货号 品名 规格
abs50065 2DLuminescent Cell Viability Assay 50mL×2
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